Оценка жизнеспособности и антагонистической активности пробиотиков в исследовании in vitro

1. Высокая скорость роста, размножения, способность к быстрому накоплению.
2. Устойчивость к воздействию неблагоприятных факторов длительного хранения и др.
3. Антагонистическая активность по отношению к условно-патогенной и патогенной флоре.

Скорость роста

В результате сравнительного исследования пробиотиков in vitro было выявлено, что бактерии, дополненные цинком, входящие в состав «Аципол Форте» (пробиотик 1), в первые сутки показали скорость роста в среднем до ~ 1,5 раза выше, чем у другого пробиотика (рис.1).

Рисунок 1. Динамика формирования биопленок пробиотиками в процессе культивирования

Культивируемые пробиотики: пробиотик 1 — Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103+ Bifidobacterium longum CECT 7894+Цинка цитрат; пробиотик 2 — 14 штаммов лакто- и бифидобактерий: L. casei PXN 37, L. plantarum PXN 47, L. rhamnosus PXN 54, В. bifidum PXN 23, B. breve PXN 25, B. longum PXN 30, L. acidophilus PXN 35, Lactococcus lactis ssp. lactis PXN 63, Streptococcus thermophilus PXN 66, B. infantis PXN 27, L. delbrueckii ssp. bulgaricus PXN 39, L. helveticus PXN 45, L. salivarius PXN 57, L. fermentum PXN 44.

Через 48 часов после начала культивирования при визуальной оценке отмечался рост всех пробиотиков (рис. 2). Наиболее активный рост и образование колоний отмечался у штаммов бактерий, усиленных цинком (пробиотик 1). Оценка видового состава пробиотика 1 показала соответствие видовому микробному составу, у пробиотика 2 при использовании различных питательных сред и различном времени культивирования было выделено 2 вида бактерий из заявленных.

Рисунок 2. Фото чашек Петри через 48 часов культивирования с колониями бактерий культивируемых пробиотиков

Культивируемые пробиотики: пробиотик 1 — Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103+ Bifidobacterium longum CECT 7894+Цинка цитрат; пробиотик 2 — 14 штаммов лакто- и бифидобактерий: L. casei PXN 37, L. plantarum PXN 47, L. rhamnosus PXN 54, В. bifidum PXN 23, B. breve PXN 25, B. longum PXN 30, L. acidophilus PXN 35, Lactococcus lactis ssp. lactis PXN 63, Streptococcus thermophilus PXN 66, B. infantis PXN 27, L. delbrueckii ssp. bulgaricus PXN 39, L. helveticus PXN 45, L. salivarius PXN 57, L. fermentum PXN 44.

Устойчивость

Биопленка, образованная микроорганизмами из состава «Аципол Форте», демонстрировала меньшую степень деградации по сравнению с биопленками другого бактериального пробиотика, что дает возможность ожидать высокого уровня колонизационной резистентности при его применении.

Рисунок 3. Показатели дегидратации биопленок при длительном культивировании

Культивируемые пробиотики: пробиотик 1 — Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103+ Bifidobacterium longum CECT 7894+Цинка цитрат; пробиотик 2 — 14 штаммов лакто- и бифидобактерий L. casei PXN 37, L. plantarum PXN 47, L. rhamnosus PXN 54, В. bifidum PXN 23, B. breve PXN 25, B. longum PXN 30, L. acidophilus PXN 35, Lactococcus lactis ssp. lactis PXN 63, Streptococcus thermophilus PXN 66, B. infantis PXN 27, L. delbrueckii ssp. bulgaricus PXN 39, L. helveticus PXN 45, L. salivarius PXN 57, L. fermentum PXN 44.

Антагонистическая активность штаммов

При изучении антагонистической активности исследуемых пробиотиков против планктонных клеток патогеных бактерий E. Coli ATCC 25922 наблюдалась антагонистическая активность по отношению к патогенам у всех бактериальных пробиотиков. Рост E. Coli в лунках этих пробиотиков полностью отсутствовал. В высевах из лунок с грибковым микроорганизмом наблюдался активный рост колоний E. Сoli, что было подтверждено их идентификацией методом времяпролетной масс-спектрометрии. Максимальную активность при формировании биопленки продемонстрировали штаммы «Аципол Форте», оптическая плотность биопленки данного пробиотика превышала оптическую плотность другого пробиотика до ~1,5 раза (рис. 4).

Рисунок 4. Значения плотности биопленок при действии пробиотиков на формирующиеся биопленки E. coli ATCC 25922

Культивируемые пробиотики: пробиотик 1 — Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103+ Bifidobacterium longum CECT 7894+Цинка цитрат; пробиотик 2 — 14 штаммов лакто- и бифидобактерий: L. casei PXN 37, L. plantarum PXN 47, L. rhamnosus PXN 54, В. bifidum PXN 23, B. breve PXN 25, B. longum PXN 30, L. acidophilus PXN 35, Lactococcus lactis ssp. lactis PXN 63, Streptococcus thermophilus PXN 66, B. infantis PXN 27, L. delbrueckii ssp. bulgaricus PXN 39, L. helveticus PXN 45, L. salivarius PXN 57, L. fermentum PXN 44.

В исследовании in vitro^* бактерии в составе «Аципол Форте» продемонстрировали²:

• Высокую активность роста уже в первые 24 часа;
• Высокую скорость роста бактерий (в среднем до ~1,5 раза быстрее в сравнении с мультиштаммовым пробиотиком^**);
• Максимальный уровень устойчивости сформированной биопленки;
• До ~1,5 раза более высокую антагонистическую активность к патогенным бактериям, чем бактерии мультиштаммового пробиотика.^**

* В пробирке, вне организма. Рассчитана средняя скорость роста пробиотиков в исследовании.
** Пробиотик — 14 штаммов лакто- и бифидобактерий: L. casei PXN 37, L. plantarum PXN 47, L. rhamnosus PXN 54, В. bifidum PXN 23, B. breve PXN 25, B. longum PXN 30, L. acidophilus PXN 35, Lactococcus lactis ssp. lactis PXN 63, Streptococcus thermophilus PXN 66, B. infantis PXN 27, L. delbrueckii ssp. bulgaricus PXN 39, L. helveticus PXN 45, L. salivarius PXN 57, L. fermentum PXN 44

Источники:

1. Рекомендации для практикующих врачей по применению пробиотиков для лечения и профилактики инфекционных заболеваний у детей, МОО «Евро-Азиатское общество по инфекционным болезням», 2025.
2. Громова О.А., Торшин И.Ю., Сорокин А.И. Фармакоинформационное исследование синергизма воздействия на микробиоту кишечника пробиотиков Lactobacillus rhamnosus ATCC 53103 (LGG), Bifi dobacterium longum CECT 7894 и цитрата цинка. 3. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2025;(1): 40-58.
Детушева Е.В., Сон Э., Детушев К.В., Фурсова Н.К., Кукес И.В.  Оценка жизнеспособности и антагонистической активности пробиотиков. Исследование in vitro., Лекарственные средства и рациональная фармакотерапия. 2025; 4(17): 39-50.

Реклама, АО «Отисифарм»